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二手高效液相色谱仪二手HPLC谱图问题的解决
发表时间:2019/7/29 15:45:56  |  点击率:11

二手HPLC液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是二手高效液相色谱仪HPLC得到好的色谱图的关键。
                              

 

(一)二手HPLC谱图峰拖尾的原因和解决方法 
1、筛板阻塞 :反冲色谱柱,更换进口筛板,更换色谱柱 ;
2、色谱柱塌陷 :填充色谱柱 ;
3、干扰峰 :使用更长的色谱柱,改变流动相或更换色谱柱 ;
4、流动相PH选择错误 :调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰 ;
5、样品与填料表面的溶化点发生反应图 :加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂,更改色谱柱。

(二) 二手HPLC谱图 峰前延的原因和解决方法 
1、柱温低 :升高柱温 ;
2、样品溶剂选择不恰当 :使用流动相作为样品溶剂 ;
3、样品过载:降低样品含量 ;
4、色谱柱损坏:反冲色谱柱,填充色谱柱。

(三) 二手HPLC谱图 峰分叉的原因和解决方法

1、保护柱或分析柱污染图 :取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清洗。如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。

2、样品溶剂不溶于流动相 :改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。

(四) 二手HPLC谱图 峰变形的原因和解决方法 
样品过载 :减少样品载量

(五) 二手HPLC谱图 早出的峰变形的原因和解决方法 
样品溶剂选择不恰当 :减少进样体积,运用低极性样品溶剂。

(六) 二手HPLC谱图 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰的原因和解决方法 
柱外效应:调整系统连接(使用更短、内径更小的管路),使用小体积的流通池。

(七) 二手HPLC谱图 K’增加时,脱尾更严重的原因和解决方法 
1、二级保留效应,反相模式:加入三乙胺(或碱性样品),加入乙酸(或酸性样品),加入盐或缓冲剂(或离子化样品),更换一支柱子 ;
2、二级保留效应,正相模式 :加入三乙胺(或碱性样品),加入乙酸(或酸性样品),加入水(或多官能团化合物),试用另一种方法 ;
3、二级保留效应,离子对:加入三乙胺(或碱性样品)。

(八) 二手HPLC谱图 酸性或碱性化合物的峰拖尾的原因和解决方法 
缓冲不合适:使用浓度50-100mM的缓冲液,使用Pka等于流动相PH值的缓冲液。

(九) 二手HPLC谱图 额外的峰的原因和解决方法 
1、样品中有其他组份:正常 ;
2、前一次进样的洗脱峰 :增加运行时间或梯度斜率,提高流速;
3、空位或鬼峰:检查流动相是否纯净,使用流动相作为样品溶剂,减少进样体积。

(十) 二手HPLC谱图 保留时间波动的原因和解决方法 
1、温控不当 :调好柱温 ;
2、流动相组分变化 :防止变化(蒸发、反应等) ;
3、色谱柱没有平衡 :在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。

(十一) 二手HPLC谱图保留时间不断变化的原因和解决方法 

1、流速变化 :重新设定流速 ;
2、泵中有气泡 :从泵中除去气泡 ;
天津快乐十分走势图 3、流动相选择不恰当 :更换合适的流动相;选择合适的混合流动相。

 

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