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液质联用仪的验收标准
发表时间:2018/6/26 15:59:05  |  点击率:359

液质联用仪标准判断

一,灵敏度,必须在单位质量分辨率下

灵敏度是用信噪比来表示的,S/N,信噪比的计算又有峰-峰比和RMS之分(RMS计算的信噪比一般要比峰-峰比计算的高5~10倍)

 RMS是在待测峰周围,找一段质量范围,然后做均方根平均,作为噪音高度(强度)。再拿待测峰的高度除以平均高度,即为RMS。

峰比,是寻找待测峰周围一个最高的噪音峰,拿待测峰的高度去比上最强的那个噪音峰。可能药物残留检测时要求如何判定时会用到。仪器验收时,不会做这事,因为即使做,也是一针好一针坏,每个实验室的结果都不一样。

质谱的一大特色,就是它是一个质量检测器,峰面积跟质量成正比。也就是说,拿1 pg/uL,进样10 uL;跟拿5 pg/uL,进样2 uL相比,如果其它条件都一样,峰面积应该是一样的。

从实验人员来说,稀释样品可能比较容易,很容易比较准确;而进样器的定量环一般为20 uL,所以进样10 uL,一定比进样2 uL来得准确一些。

 

 

二,分辨率,必须指明在哪个具体的质量处

1)对于磁质谱,我们如果说分辨率为10000,比常规有机质谱10000的分辨率,要好很多很多。

2)对于四极杆、离子阱,分辨率用10000表示是不科学的,因为它总在变,所以用FWHM或R=nM表示比较好,因为它在基本m/z范围内是不变的。或者,说明是在哪个质量数下测定的,比如在500 m/z时,分辨率优于5000。

3)对于TOF/FT/Orbitrap等,必须指明在哪个质量数下面测定的,也用10000、20000 之类的数字来表示。

 

 

三,单位质量分辨下的m/z范围

必须是单位质量分辨以内的m/z范围

1、四极杆型

 最高的极限大约在3000~4000 amu

 那么,四极杆最擅长的就是定量!

 2、离子阱型

 最高的极限大约在4000(单位质量分辨下),

离子阱普遍对小质量有歧视(1/3效应),但对大质量(比如1000 amu以上的)反而比四极杆的响应好。

 3,飞行时间TOF

单独的TOF做个十几万没什么问题,但在串联了前端的四极杆、离子阱后,二级质谱(MS/MS)的m/z范围就会受到四极杆、离子阱的限制。

单从液质联用来说,能做串联质谱是非常重要的,因为液质的背景干扰比气质大得多,串联质谱就是要去除背景。作为前端的质量选择器,大部分都采用四极杆或者离子阱。

四,谈扫描速度

首先必须声明,扫描速度不是非常重要的一个指标。因为实际获得一种谱图,我们考虑的是duty cycle的时间,也就是采集一张谱图需要多少时间。所以,考察仪器“快”、“慢” 的主要衡量标准,应该是duty cycle时间,而不是扫描速度。

扫描速度指的是:把规定m/z范围内的离子一个一个“扫描”出质量分析器的能力,表示为:amu/sec。这仅仅指从分析器出来的一段时间,质量分析器不同、工作模式不同,差别就很大。

1、四极杆:

duty cycle时间=扫描时间+扫描之间的间隔时间

对于全扫描,比如 扫描m/z 50~550 amu,扫描速度1000 amu/sec,可知道扫描时间为:500/1000=0。5秒=500 毫秒,间隔时间为几个毫秒,所以,大约每秒可以采集2张全扫描谱图。

对于SIM,比如扫描 m/z 499.5~500.5 amu,扫描速度1000 amu/sec,可知道扫描时间为:1/1000=0.001秒。间隔时间就比较重要了,为几个毫秒,所以,用SIM,每秒可采集几百张谱图

 2、TOF

 TOF是最快的质量分析器,如果只求快,不要求分辨率,可以快到每秒采集几万张全扫描谱图。

 如果还要求高分辨率,可以每秒采集1~20张全扫描谱图。

液质联用仪,质谱色谱联用,可以获得丰富的信息量,提高工作的效率,比如以前两次甚至三次实验做的事,现在一次实验就搞定。

 

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